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残留聚乙二醇(PEG)含量测定

1试剂

1.1 PEG(MW4000或6000)。

1.20.5mol /L高氯酸(HClO4)溶液。

1.3 5%BaCl2溶液。

1.40.1mol /L碘溶液。

2 操作

2.1 取1ml样品,在灵敏度允许的范围内,先将样品稀释到蛋白质浓度≤1%,加入5.0ml 0.5mol /L高氯酸溶液,15分钟后,用4000r/min,离心10分钟,取上清液(如蛋白浓度过高,上清混浊,则要过滤至清)。

2.2 PEG测定

于4ml上清液中加入1.0ml5%BaCl2和0.5ml的0.1mol/L碘溶液,反应15分钟后,进行比色。记录各样品的A535值。

2.3 标准曲线的绘制

取≤1%蛋白质溶液,另入PEG合成10~80μg/ml 溶液。根据样品的大致浓度,用去除蛋白质后溶液制剂作标准曲线。

2.4 根据样品读数,从标准曲线上查出PEG含量。

3 计算

样品中PCG浓度%(g/ml)=样品稀释倍数×查得标准曲线相应的PEG浓度

附注

1.整个比色过程应在试剂加入以后的15~45分钟内完成,否则将要影响结果。

2.本方法的灵敏度随被测定PEG的分子量的增加而提高。