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第二十章 低密度脂蛋白受体的检测

脂蛋白受体主要包括乳糜粒受体(CM-R)、极低密度脂蛋白受体(VLDL-R)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、高密度脂蛋白受体(HDL-R)和清道夫受体(scavenger receptor)等。脂蛋白受体的检测与一般受体检测方法的原理及操作基本类同。目前研究最多,应用最广的要属LDL-R,其他脂蛋白受体如清道夫受体、VLDL-R等的检测方法与LDL-R基本相似,多采用[SB]125[/SB]Ⅰ标记的配体检测或是[SB]3[/SB]HTdR掺入法等。本章以LDL-R为代表介绍脂蛋白的检测方法。

低密度脂蛋白受体(LDL-R)广泛分布于人与动物的各种细胞和组织,如肝细胞,成纤维细胞,血管平滑肌细胞,淋巴细胞,单核细胞及肾上腺、卵巢等。LDL-R是一种跨膜糖蛋白,位于细胞表面被膜凹的浆膜部位。主要功能是参与LDL-R的代谢过程,与含有ApoB[XB]100[/XB]、ApoE的LDL、β-VLDL等结合,并内吞入细胞,LDL-R缺乏则导致血中胆固醇异常。家族性高胆固醇血症(FH)是LDL-R基因突变引起的LDL-R缺乏以致胆固醇异常的显性遗传性疾病。其特征为血胆固醇显著升高、黄色瘤和早发心肌梗塞。人群中杂合子型FH(LDL-R减少)发生频率为1/500,纯合子型FH(LDL-R缺乏)较少见,发生频率约为1/1000000,通常在儿童期即发生心肌梗塞。FH的发病率在我国也是比较高的,因此LDL-R的检测对于筛选人群中的FH患者及预防冠心病、心肌梗塞等具有重要意义。

细胞表面的LDL-R的分析可通过以下几种检测方法进行:检测同位素或非同位素标记的LDL与LDL-R的结合力(或率),推算受体最大结合浓度,在限制性生长条件下检测细胞分裂抑制率。判断LDL受体活性;用抗体直接测定LDL-R量或者对受体直接进行蛋白质结构和基因图谱分析。