第五章　非淋菌性泌尿生殖道炎

非淋菌性泌尿生殖道炎（nongonococcal urethristis，NGU）又称非淋菌性尿道炎，是一种性传播疾病，包括有明显尿道炎症状却找不到淋病双球菌，以及淋病经治疗后，培养或涂片未发现淋球菌而尿道炎症状持续存在的患者（也称淋病后尿道炎post-gonococcal urethritis），过去统称为非特异性尿道炎（Non-specificurethritis）。据统计，约70-80%的非淋菌性尿道炎是由沙眼衣原体与分解尿素支原体引起。非淋菌性尿道炎可与淋菌性尿道炎同时或交叉感染，约25-50%的女性患者可合并淋病。

非淋菌性尿道炎与淋病一样，好发于青年性旺盛期，好发年龄组依次为20-24岁，15-19岁，25-29岁，其中25岁以下占60%。60年代以来，非淋菌性尿道炎的发病率急骤上升，已超过淋病而居欧美性病的首位（在英国，非淋菌性尿道炎是淋病的2倍，而美国则达3倍之多）。80年代，美国每年新发生的病例达300-400万，故有人称之为80年代的性病。女性患者由于症状不明显，难以得到确切的发病率，但有人统计女性患者是男性的4倍。下面分别介绍衣原体感染和解脲支原体感染引起的非淋菌性尿道炎。

第一节　衣原体感染症（chlamydia trachomatis）

沙眼衣原体是（chlamydia trachomatis，CT）是一种在人体内长期生存并又广泛传播的病原体，属条件致病菌。它在一定条件下能引起子宫颈感染、早产、流产及尿道感染等多种疾病，尤其是在与淋球菌等其他病原体合并感染时更加重疾病的发展及引起其它并发症，在无症状子宫颈和男、女性泌尿系统常有沙眼衣原体的存在，其检出率不一。至今，西方国家已有10-20%的人口感染有沙眼衣原体，特别是性接触而传播其感染率更高，成为目前医学所关注的重大问题之一。最近，在对我国大陆性乱人群进行检查时发现，有相当多的人其泌尿生殖系统感染有CT，并已构成我国性传播疾病（STDs）。

一、病原学

衣原体是一类能通过细胞滤器，有独特发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。具有以下特点(1)具有DNA和RNA两种类型的核酸；(2)二分裂方式繁殖，发育周期特别；(3)细胞壁成份中含有肽聚糖；(4)含有核蛋白体；(5)对多种抗生素都敏感。衣原体广泛寄生于人类，哺乳动物及鸟类，仅少数有致病性。只有沙眼衣原体和鹦鹉热衣原体可以引起人类疾病。

目前已知衣原体有15种血清型。A、B、Ba、C血清型主要引起眼疾患，D-K型引起生殖器疾患，L­1-L3型为引起性病淋巴性肉芽肿的病原体。它们严格称细胞内寄生微生物，大小约300-400μm，在细胞内生长繁殖，有特殊的发育周期，感染力为基本小体，增殖力为网状体，在电镜下可见胞膜呈有丝分裂繁殖。

衣原体对热敏感，56℃-60℃仅能存活5-10分钟，在-70℃可保存数年。0.1%甲醛液、0.5%石碳酸可将衣原体在短期内杀死，75%乙醇杀灭力很强，半分钟即有效，对利福平、四环素、红霉素均敏感。

二、流行病学

近年来各种报道显示，淋菌性尿道炎发病率下降，而非淋菌性尿道炎却不断上升，居STDs的首位。其中CT感染所致的病例显著增加，如美国报道非淋菌性尿道炎约半数为CT所致，在淋病中有20-40%从病灶中分离出CT，另据报道男性非淋菌性尿道炎在世界急剧上升，以美国为例、一年间就300万人患本症。女性宫颈炎等，在女性生殖器感染症中CT也是其主要的病原菌。

男性非淋菌性尿道炎最常见的病原菌是沙眼衣原体。在美国异性恋男性中沙眼衣原体阳性率达40%，每年约有60万男性患者呈持续性或复发性NGU，同时发现沙眼衣原体宫颈炎妇女其男性性伴侣的感染率为42%，患衣原体尿道炎的男性其女性性伴侣的感染率为62%，无症状的沙眼衣原体感染在性活跃的男人间传播率更高。

引起男性不孕症的因素很多，但最近发现从无生殖力的脓性精液及男子性腺活检标本中分离出沙眼衣原体，进一步提示和证明了沙眼衣原体引起男性不孕症的可能性。有人对淋病感染症的男性患者进行观察，发现体内有高效价的抗衣原体抗体，衣原体阴性淋菌尿道炎者亦有高价抗衣原体抗体，并发现65-85%的非淋菌性后尿道炎是由沙眼衣原体引起。

附睾炎是男性NGU最主要的并发症，在年轻的性活跃的男性附睾炎患者中，45-60%是由沙眼衣原体引起。大多数病人有尿道症状或体征，尿道标本和附睾吸取液中可分离到衣原体。

沙眼衣原体性子宫颈炎在女性衣原体感染中最多。因为感染只发生于子宫颈的柱状上皮，而不感染阴道的鳞状上皮，故不造成阴道炎。英国去性病门诊就医的妇女衣原体培养阳性率为20-30%，微量免疫荧光法检测血清抗体达60%。淋病患者的宫颈炎标本衣原体阳性率为30-35%，伴不典型宫颈炎或无症状衣原体宫颈感染为3-5%，说明衣原体隐性感染率和混和型感染率相当高，对宫内避孕器的应用者进行测定，发现由避孕器引起的盆腔炎症中大部分是由衣原体感染所致。在男性NGU患者配偶的宫颈中有30-60%分离出衣原体。在与感染的

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性乱及正常家庭中，沙眼衣原体的泌尿生殖道感染率在5-25%之间，特别是家庭成员之间的传播更应引起重视，不少儿童性NGU是由沙眼衣原体的感染引起的。

三、传播途径

男性非淋菌性尿道炎约30-70%可通过性交传染给女性，反之亦有25-50%患有衣原体性宫颈炎的女性经性交亦可传给男性。新生儿由母体垂直感染，发生衣原体性结膜炎，有10-20%发生肺炎，女性感染CT还有由宫颈炎上升而并发腹腔内诸器宫感染。由于“口交”亦能引起口腔内衣原体感染。另外，由宫颈、输卵管处分离出CT的事实，也可说明其传播途径。

应该说明一点：当今有些所谓NGU与性行为并无关系，如医源性感染（尿道插管、膀胱镜以及外伤或化学性刺激等）。还有所谓NGU并非是由衣原体性微生物所致，在含义上应该与NGU加以区别，因为病原体不同，而传播途径也有所不同，故医生在诊治中要心中有数。

四、发病机理与免疫

衣原体感染人体后，首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖，然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于衣原体在细胞内繁殖，导致感染细胞死亡，同时尚能逃避宿主免疫防御功能，得到间歇性保护。衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢，溶解破坏细胞并导致溶解酶释放，代谢产物的细胞毒作用，引起变态反应和自身免疫。

当人体感染衣原体后，产生特异性的免疫，但是这种免疫力较弱，持续时间短暂，因此，衣原体感染容易造成持续，反复感染，以及隐性感染。细胞免疫方面，大部分活动性已治愈的衣原体患者，给予相应的抗原皮内注射时，常引起迟发型变态反应。这种变态反应可用淋巴细胞进行被动转移。此种免疫性很可能是T细胞所介导。体液免疫方面，在衣原体感染后，在血清和局部分泌物中出现中和抗体。中和抗体可以阻止衣原体对宿主细胞的吸附，也能通过调理作用增强吞噬细胞的摄入。

五、临床表现

（一）男性衣原体性尿道炎（chlamydia urethritis，CU）

又称为非淋菌性尿道炎（NGU）。是由衣原体感染引起的非急性化脓性尿道粘膜炎性病变。目前已成为STDs中最常见的一种。

本病潜伏期比淋病长，约1-3周或数月，主要表现为尿道内不适，刺痛及烧灼感，并伴有不同程度的尿频、尿急、尿痛，尿痛较淋病为轻。尿道口轻度红肿并有浆液或粘液脓性分泌物，稀薄而量少，长时期不排尿或早晨首次排尿前可见尿道口分泌物污染内裤，并可见尿道口有“糊口”现象；分泌物少时，于晨起挤压尿道才流出少量粘液。合并膀胱炎时可有血尿；无症状性非淋菌性尿道炎，约30-40%病人症状不典型或根本无症状。约1/3左右的淋球菌尿道炎病人合并沙眼衣原体感染，淋病治愈后又出现尿道炎症状，易误诊为慢性淋病或PPNG菌株感染。

沙眼衣原体感染易并发附睾炎，表现为附睾肿大，变硬及触痛，多为单侧，部分患者的抗沙眼衣原体抗体升高，可直接从附睾抽吸液中分离出沙眼衣原体；累及睾丸可出现睾丸炎，表现为睾丸疼痛、触痛、阴囊水肿及输精管变硬变粗；累及前列腺时可出现后尿道、会阴及肛门部位钝痛或触痛，可有性功能障碍，直肠镜检可触及有压痛的前列腺。如前列腺明显肿大，可压迫后尿道而出现尿流变细、排尿无力及尿流中断等；本病还可以合并Reiter综合征，即关节炎，结膜炎，尿道炎三联症。

（二）女性生殖系统衣原体感染症

女性感染衣原体不限于尿道，可累及整个泌尿生殖器官，此类感染常因缺乏自觉症状或症状轻微而忽视了治疗，造成传染源而扩散，形成危害。

女性衣原体感染比男性感染引起的症侯要多，其主要感染部位为宫颈，由此垂直感染给新生儿，以至发生PID等，其后遗症多导致不孕症。

无症状感染（缺乏症状反应）：由于本病缺乏自觉症状，则局部病象便成为诊断的一个重要指标，表现为阴道有脓样分泌物，亦可为粘液或浆液性。分泌物量较多（为中等量），稍有臭味。阴道粘膜为正常颜色，但常伴有宫颈糜烂。

衣原体性宫颈炎：当伴发宫颈炎时、宫颈发红，有浆液或脓性分泌物增加、阴道内糜烂扩大，易于出血等症状。镜检下阴道分泌物的所谓“阴道清洁度”多为III度以上。沙眼衣原体主要侵犯宫颈的柱状上皮细胞，而磷状上皮细胞常不被侵犯，故阴道，宫颈局部没有改变。

宫颈炎的主要症状是白带增多，不时出血及小腹部疼痛等一般症状，无特异性表现，多因其性伴患有尿道炎而来院就诊。

衣原体性输卵管炎，本症多由宫颈炎并发引起。用腹腔镜直接从输卵管抽吸物标本中，约30%以上检测出衣原体，病情经过多数较轻、下腹部可有轻微疼痛，一般体温不高，但血沉稍快。由于这种非典型经过，使病人拖延就医，往往引起子宫附件损害，形成输卵管炎的后遗症，其最主要表现是输卵管性不孕症。

盆腔炎（PID）：PID不是固定疾患的用语，凡在盆腔内感染症，如宫内感染，输卵管炎等附件炎症波及盆腔腹膜特定的部位感染均可称之为PID，由CT引起的PID主要是由宫颈炎上行感染所致。其主要表现是急腹症型。

部分患者可导致宫外孕、流产、不孕、死胎及新生儿死亡。有些病人除不孕外，可无任何症状。也可通过产道传染，引起婴儿眼结膜炎、鼻炎、中耳炎、肺炎及阴道炎等。

六、诊断与鉴别诊断

诊断衣原体性疾患，目前在我国尚未普及，因此，往往漏诊，所以应当重视临床表现，争取做到化验室检测指标求得确诊。

患者来就医时，男性主诉常常是尿道疼，不适感或从外尿道流出脓样粘液，或因患“淋病”久治不愈，反复出现上述现象；女性病人常常无症状，只是白带多或因其丈夫有“淋病”史，特意来检查确诊。

（一）临床症状

首先应排除淋菌性尿道炎

衣原体性尿道炎与淋菌性尿道炎鉴别

（二）实验室诊断

检测出病原体或病原体特异性DNA是诊断本病唯一标准，近年来由于对CT直接分离培养成功，加之基因诊断技术在CT诊断方面的成功应用，使过去认为难以诊断的疾患已提高到最易诊断的一种疾患，但是上述两项技术特殊，对操作人员及实验设备要求严格，在一般医院实行起来尚难完成。一般只用CT抗原法进行诊断。

1．衣原体细胞培养：对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞，最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞，孵育后，用单克隆荧光抗体染色，可迅速诊断，但操作人员一定要熟练，需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%，阳性即可确立诊断。

2．衣原体细胞学检查法：在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从感染部位采取细胞标本作涂片，姬姆萨染色包涵体是蓝色或暗紫色，碘染色显示褐色。但敏感性差（40%），目前已较少采用。

近年来采用荧光素标记的抗衣原体单克隆抗体，来检测细胞涂片中的衣原体，使用较为方便，目前主要用衣原体外膜蛋白（MOMP）的单克隆抗体的商品试剂（Mico Trak，Pathfinder，Monofluor）。结果判断：要衣原体数>10个才能判为阳性。

3．PCR检测衣原体DNA：

（1）标本的处理：

①取材部位为子宫颈管，男性为尿道，将灭菌白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本缓冲液中。

② 衣原体DNA提取：

将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5% NP-40、0.5%Tween 20，1% SDS和2mg/ml 蛋白酶K的TES缓冲液（50mmol/L Tris-HCl，50mmol/l NaCl，100mmol/L EDTA，pH 8.0）置37℃裂解60min，沸水5min，酚、氯仿抽提DNA，乙醇沉淀，沉淀物溶于20μlTE缓冲液(100mmol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA，pH 8.0)。

（2）引物设计：

引物对选自衣原体16SrRNA基因，为衣原体属特异性，以DNA合成仪固相亚磷酸三酯合成并纯化。引物对的序列分别为5′GTGGATAGTCTCAACCCTAt 3′(16SrRNA基因位点832-851)和5′TATCTGTCCTTGCGGAAAAC3′(位点1041-1022)。目的扩增片段（832-1041）长210bp。

（3）PCR扩增：

传统的方法反应体积为100μl，含5x反应缓冲液20μl和FD-DNA聚合酶2U、4种dNTP各200μmol/L以及引物对各25pmol/L。上述成分预先一次性分装于0.5ml离心管，-20℃备用。临用加模板DNa 2μl，短暂离心，加100μl矿物油覆盖。现在试剂已商品化，反应体积为25μl，单管已分装好，只要加入模板DNA即可。置DNA扩增仪进行40次循环扩增。每次循环包括90℃变性45s(第一次循环变性2min)，55℃退火30s和72℃延伸40s（最后一次循环72℃，延伸5min）三个步骤。每次扩增均应作阴阳性对照。

（4）扩增产物的检测

① 1.5%琼脂糖凝胶电泳检测：取10u l PCR扩增物作1.5%琼脂糖凝胶电泳、0.5μg/ml溴化乙锭染色，以PGEM-3Zf（+）DNA-Hae Ⅲ为分子量标准，置紫外透射仪观察结果。

② 生物素寡核苷酸探针的检测

a.探针序列及合成：探针序列为5′ACTCAA-AAGAATTGACGGGGGCCCGCACAa3′(30mer)，衣原体16Sr RNA基因中的位点为909-938，与PCR扩增片段中间序列互补。以DNA合成仪固相亚磷酸三酯法合成并纯化。

b.标记：按Riely等方法略有修改。以末端脱氧核糖核酸转移酶（TdT）催化Bio-11-dUTP标记到合成的寡核苷酸探针片段3′-OH端。反应体系含：140mmol/L二甲胂酸钠，30mmol/l Tris-HCl（pH 7.6），100μmol/L Bio-11-dUTP，0.1μmol/L 寡核苷酸片段，0.05%BSA，300U/mlTdT。于37℃保温3h后，加10mmol/LEDTA终止。寡核苷酸片段探针标记后，将标记探针（1ng/μl）作2倍系列稀释，取5μl点膜,封闭后显色。结果探针经32倍稀释（最高稀释度5ng）后仍呈现明显的显色反应，证实探针的标记以及显色效应良好。

c.DNA斑点杂交：提取的DNA或其PCR扩增产物0.5mol/l NaOH变性20min，取5μl点于硝酸纤维素膜，烘干；以6×SSC(1xSSC为：0.15mol/l NaCl，0.015mol/L柠檬酸三钠，pH 7.0)浸泡2次，80℃干烤2h。置6×SSC，5×Denhardt液，0.2%SDS，50μg/ml变性牛胸腺DNA，10mmol/l EDTA中于55℃杂交3h后，加入终浓度为150μg/ml的探针，于55℃杂交过夜。以2×SSC-0.1%SDS室温漂洗3次，每次15min。

d.显色：将杂交漂洗后的滤膜浸泡于0.1mol/l Tris-HCl (pH7.5)，0.15mo l/L NaCl，0.05%Tween20，0.05%%TritonX-100，2%BSA中，37℃封闭6min；置4μg/ml亲和素的缓冲液A（0.1mol/l Tris-HCl，0.15mol/LNaCl，pH 7.5）中，37℃孵育30min，缓冲液A漂洗3次；再置于含1μg/ml生物素化碱性磷酸酶的缓冲液A中，37℃作用30min，缓冲液A漂洗2次，缓冲液B（0.1mol/lTris-HCl，0.1 mol/L NaCl，50 mmol/L MgCl2，pH 9.5）漂洗2次。最后将膜泡于含0.1mg/ml磷酸萘酚AS-MX和0.6mg/ml坚固蓝RR的缓冲液B中，暗处显色30min。

PCR扩增衣原体DNA有十分高的特异性及敏感性，结合生物素标记的衣原体寡核苷酸探针作DNA斑点杂交。可作为衣原体诊断的金标准，其敏感度可以检测相当于1个拷贝的衣原体DNA分子。

七、治疗

衣原体对作用于细胞壁的药物耐药，如青霉素类、万古霉素、杆菌肽，对于抑制膜蛋白和胞浆蛋白合成药物敏感，如四环素、红霉素等。

治疗方案

首先四环素类，四环素500mg每日4次，连服7天，或用强力霉素100mg每日2次，连服7日。对四环素禁用或耐受性差的患者，可改服红霉素500mg，每日4次，连服7日，复方新诺明亦有效。

另外近年来新开发的对各领域的感染症广泛使用的新药喹诺酮类，在治疗衣原体方面临床效果较好，其中常用的药物有氧氟沙星（OFIX），环丙沙星（CPFX），洛美沙星，利福平治疗效果也较好。

治疗中应注意的问题：

（1）四环素类药物对妊娠妇女有致畸作用，故应禁用。

（2）从目前临床观察来看用喹诺酮类药物比应用四环素类药物为好，因为患者多数有淋球菌或其它合并感染。

（3）治疗时间2-3周为宜。衣原体繁殖周期为48-72小时，寄生在细胞内，药物渗入细胞内的浓度一般较低。所以治疗时间需要长些。

（4）在男女感染后无症状或症状轻微者，可视为带菌者，应接受正规治疗。对患者的性伴要同时治疗。

（5）联合用药：四环素类+喹诺酮类

红霉素类+喹诺酮类

四环素类+利福平

喹诺酮类+利福平

第二节　支原体性感染症

生殖器支原体（Mycoplasmasemtalium）感染是近年新明确的一种性接触传播疾病。

一、病原学

支原体（Mycoplasmal）是目前所能发现的能在无生命培基中生长繁殖的最小的微生物。它广泛分布于自然界，有80余种，与人类有关的支原体有肺炎支原体（M-pneumonie，Mp）、人型支原体（M.humenis，MH）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum，UU）和生殖器支原体（M.genitalium，MG），前者引起肺炎，后三者引起泌尿生殖道感染。支原体体形多样，基本为球形，亦可呈球杆状或丝状，其菌落呈针尖大小，故又称之为微小支原体。支原体特点是无细胞壁及前体，细胞器极少。DNA的G+C含量低，菌体内具有非常小的染色体组，其分子量约为45×108，菌体细胞大小约为0.2-0.3μm，很少超过1.0μm。由三层蛋白质和脂质组成的膜样结构以及一层类似毛发结构组成。支原体由二分裂繁殖，形态多样。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长。用培养基培养。营养要求比细菌高。由于它没有细胞壁，因此对影响细胞壁合成的抗生素，如青霉素等不敏感，但红霉素、四环素、卡那霉素、链霉素、氯霉素等作用于核蛋白体的抗生素，可抑制或影响支原体的蛋白质合成，有杀伤支原体作用，支原体对热抵抗力差，通常55℃经15分钟处理可使之灭活。石碳酸，来苏儿易将其杀死。在培养基中置入脲素并以硫酸锰作指示剂极易与其他支原体作出鉴别。

二、流行病学

由于诊断条件所限和命名上的问题。国内尚无系统的人群调查资料，支原体可存在于健康携带者，而在性乱者、同性恋、妓女、淋病患者中检出率较高，我国报道7个地区健康人携带率为解脲支原体（UU）占10.59%，人型支原体（MH）占5.34%。性乱者UU的检出率为71.7%，MH为19.57%。调查表明，性伴数越多，性活跃指数越大，UU和MH感染率越高。

三、传播途径

成人主要通过性接触传播，新生儿则由母亲生殖道分娩时感染。成人男性的感染部位在尿道粘膜，女性感染部位在宫颈。新生儿主要引起结膜炎和肺炎。

四、发病机理与免疫

支原体只能粘附在呼吸道或泌尿生殖道的上皮细胞表面的受体上，而不进入组织和血液。支原体引起细胞损害的原因为：粘附于宿主细胞表面的支原体从细胞吸收营养，从细胞膜获得脂质和胆固醇，引起细胞损伤；支原体代谢产生的有毒物质，如溶神经支原体能产生神经毒素，引起细胞膜损伤；脲原体含有尿素酶，可以水解尿素产生大量氨，对细胞有毒害作用。支原体除可以粘附于细胞、巨噬细胞表面外，还可以粘附于精子表面，从而阻止精子运动，其产生神经氨酸酶样物质可干扰精子与卵子的结合。这就是支原体感染引起不育不孕的原因之一。

在动物实验发现，小鼠腹腔巨噬细胞可以杀灭支原体，而中性粒细胞的作用不大。在体外，IgG1和IgG2抗体有调理作用。可加强巨噬细胞对支原体的杀伤作用。

五、临床表现

潜伏期为1-3周，典型的急性期症状与其他非淋病性生殖泌尿系统感染相似，表现为尿道刺痛，不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛，特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿，分泌物稀薄，量少，为浆液性或脓性，多需用力挤压尿道才见分泌物溢出，常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口，或见污秽裤裆。约有三分一的病人可无任何自觉症状。只是在例行检查时才被发现。50%病人初诊被忽略或误诊，约有10%-20%的患者同时有淋球菌双重感染。

亚急性期常合并前列腺感染，患者常出现会阴部胀痛、腰酸、双股内侧不适感或在做提肛动作时有自会阴向股内侧发散的刺痛感。肛诊时前列腺纵沟不明显或表面类似核桃壳凹凸不平，少数病例B型超声波诊断可证实不同程度的增大。合并副睾炎者不多见。

女性患者多见以子宫颈为中心扩散的生殖系炎症。多数无明显自觉症状，少数重症病人有阴道坠感，当感染扩及尿道时，尿频、尿急是引起病人注意的主要症状。感染局限在子宫颈，表现为白带增多、混浊、子宫颈水肿、充血或表面糜烂。感染扩及尿道表现为尿道口潮红、充血、挤压尿道可有少量分泌物外溢，但很少有压痛出现。

支原体感染常见的合并症为输卵管炎，少数患者可出现子宫内膜炎及盆腔炎。

六、诊断及鉴别诊断

（一）临床诊断

有不洁性交史，有尿道、阴道分泌物及排尿灼痛表现者而又排除其他病原体感染的可能性，取尿道或宫颈分泌物涂片，在1000倍显微镜下可见多形核白细胞≥5个，可作初步诊断。

（二）实验诊断

支原体感染的实验室诊断主要是支原体的培养和血清学鉴定，目前主要采用基因诊断。

1．支原体培养：

a．采集标本，一般为泌尿生殖试子或刷片，少数取前列腺液，精液、关节液，或取输卵管，直肠活检物，近年来用初段尿标本离心物，以取代尿道拭子。拭子取材时，将拭子插入男性尿道2-4cm，用力擦取。该方法容易造成尿道损伤及继发感染。用时须慎重。女性则需先清洁宫颈鳞状与柱状上皮结合部，用细胞刷收集宫颈标本，能增加感染细胞的数量，较棉拭子敏感性高。

b．常用培养基为牛心浸液或蛋白胨，并含1%新鲜酵母浸液，10-20%动物血清及0.5%氯化钠，还可加葡萄糖和精氨酸以促进MH和MG生长，加入尿素以供UU代谢，适量加青霉素抑制杂菌。

2．血清学鉴定法：最常用的是琼脂扩散法，即将支原体接种到琼脂皿上。然后再用浸过适量血清的滤纸放到琼脂表面，观察哪一种能抑制支原体生长。也可用琼脂表面的菌落作荧光抗体染色法，用落射荧光显微镜观察，此法的优点是可以利用最初生长在琼脂表面上的菌落而不必将支原体传代。

血清学诊断试验：酶联免疫吸附试验（ELISA）敏感性高：微量免疫荧光法（MIF）具有快速特点。

3． 基因诊断：利用DNA探针对支原体诊断其敏感性稍差，但特异性高，用聚合酶链反应（PCR），敏感性、特异性均高。具体检测方面如下：

（1）标本处理

1．取材部位为子宫颈管，男性为尿道，将灭菌白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右，转动数圈，停留约30s，取出后置标本缓冲液中。

2．解脲脲原体DNA提取：

将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5%NP-40、0.5%Tween20，1%SDS和2mg/ml蛋白酶K的TES缓冲液（50mmol/l Tris-HCl，50mmol/L NaCl，100mmol/ L EDTA，pH 8.0），置37℃裂解60 min，沸水5min，酚，氯仿抽提DNA乙醇沉淀，沉淀物溶于20μl TE缓冲液(100mmol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA，pH 8.0)。

（2）引物设计

引物来源于解脲脲原体，脲酶基因序列：

UU1：CAGATACATTAAACGAAGCAGG（1613-1635）

UU2：GTGGTGACATACCATTAAC（1837-1819）

（3）PCR扩增

传统的方法为的反应体积为100μl，含5x反应缓冲液20μl和FD-DNA聚合酶2μ、4种dNTP各200μmol/L以及引物对各25pmol/L。上述成分预先一次性分装于0.5ml离心管，-20℃备用。临用加模板DNa 2μl，短暂离心，加100μl矿物油覆盖。现在试剂已商品化，反应体积为25μl，单管已分装好，只要加入模板DNA即可。置DNA扩增仪进行40次循环扩增。每次循环包括90℃变性45s(第一次循环变性2min)，55℃退火30s和72℃延伸40s（最后一次循环72℃，延伸5min）三个步骤。每次扩增均应作阴阳性对照。

（4）扩增产物的检测

1．1.5%琼脂糖凝胶电泳检测：取10u lPCR扩增物作1.5%琼脂糖凝胶电泳、0.5μg/ml溴化乙锭染色，以PGEM-3Zf（+）DNA-Hae Ⅲ为分子量标准，置紫外透射仪观察结果。

2. 治疗：治疗基本同衣原体治疗。强力霉素100mg口服，每日2次，连服7-14天或阿齐霉素1g，单剂量口服，半衰期长达60小时，一次口服，可维持有效浓度5天；氟嗪酸0.2，口服，每日2次，连服7-14天。